五、砷盐检查法

　　(一)古蔡氏法

　　1. 原理：金属锌与酸作用生成新生态的氢，与药物中的微量砷盐生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，判断药物中砷盐的含量。

　　条件：

　　(1) 比色范围

　　0.002mgAs3+/33ml

　　标准溶液：As2O3(1μgAs/ml)

　　药典规定用2ml制备标准砷斑。

　　(2) 盐酸酸性

　　HCl (5mlHCl/33ml)

　　(3) 碘化钾与氯化亚锡作用

　　a. 还原As5+为As3+，加快反应速度;

　　b. 碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行;

　　c. 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生;

　　d. 可抑制微量Sb的干扰，在实验条件下，100 mgSb存在不干扰。

　　4) 锌粒应无砷

　　(5) 醋酸铅棉花

　　样品中硫化物生成的硫化氢气体干扰显色，以醋酸铅棉花吸收消除干扰。

　　药典规定：醋酸铅棉花60mg，装管高度为60~80mg。

　　6) 溴化汞试纸

　　溴化汞试纸生成砷斑的灵敏度较氯化汞高，但所生成的砷斑不够稳定，反应中应干燥避光，并在反应后立即进行比较。

　　4. 干扰及排除

　　1)供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐

　　干扰：生成硫化氢或二氧化硫

　　排除：加硝酸处理使成硫酸盐

　　(2)供试品为铁盐

　　干扰：消耗碘化钾、氯化亚锡等还原剂，影响测定条件，氧化砷化氢

　　排除：先加酸性氯化亚锡试液，将高铁离子还原为低价铁离子后再检查

　　3)有机砷需进行有机破坏

　　4)供试品为含锑药物

　　干扰：锑还原为锑化氢，与溴化汞试纸反应生成锑斑

　　干扰的排除：改用白田道夫法

　　古蔡氏法适用于不含Sb或含Sb量小于100mg的供试品

　　(三 )二乙基二硫代氨基甲酸银 — Ag-DDC法

　　原理：砷化氢与Ag(DDC)溶液作用，使Ag(DDC)中的银还原为红色胶态银。直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较。

　　锑化氢与Ag(DDC)的反应灵敏度较低。

　　此方法中，含量500ug以下的锑不干扰测定。

　　六、溶液颜色检查法

　　一)第一法 目视比色法

　　二)第二法 分光光度法

　　三)第三法 色差计法

　　恒重：

　　供试品连续两次炽灼或干燥后的重量差异在0.3mg以下。

　　炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30min后进行。

　　炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为700～800℃

　　炽灼残渣检查后，将残渣留作重金属检查时，炽灼温度应为500～600℃

　　干燥失重测定的方法有

　　B.常压恒温干澡法

　　C.减压干燥法

　　D.干燥剂干燥法

　　E.减压干燥剂干燥法

　　特殊杂质及其检查方法

　　色谱分析法

　　一)TLC

　　(1)杂质对照品法

　　判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点

　　优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强;

　　缺点：需要杂质对照品。

　　2)供试品溶液自身稀释对照法

　　判断：控制杂质斑点个数;供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点

　　优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液

　　缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。

　　二)HPLC

　　1)外标法测定供试品中某个杂质的量

　　供试品→供试品溶液

　　杂质对照品→对照品溶液进样，测定，计算杂质的含量

　　缺点：需要对照品;不易准确控制进样量

　　2)内标法加校正因子测定法

　　方法：内标物+杂质对照品→对照溶液，进样，测定，计算校正因子 。

　　供试品+内标→供试品溶液，进样，测定杂质和内标峰面积或峰高，计算杂质含量。

　　(3)不加校正因子的主成分自身对照法

　　方法 ：

　　分别进样，测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和，与对照溶液主成分峰面积比较，控制供试品中杂质的量。

　　优点：不需杂质对照品，可同时控制各个杂质及其总量限度。

　　缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，准确度差;不易准确控制进样量。

　　4)加校正因子的主成分自身对照法

　　方法：待测成分对照品+杂质对照品→溶液，进样，记录色谱图，计算杂质的校正因子

　　(5) 峰面积归一化法

　　取一定量供试品溶液进样，测定各杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不能超过限量。

　　注意：溶剂峰不应计算在总峰面积内。

　　优点：不需杂质对照品，简便易行。

　　缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，控制杂质峰面积百分率不一定就是杂质限量，准确度差。