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2013执业药师药物分析:色谱法

  2013执业药师药物分析:色谱法

  薄层色谱法

  一、基本原理

  吸附剂对不同组分A和B具有不同吸附能力,展开剂也对A和B有不同溶解、解吸能力,当展开剂不断展开,A、B在吸附剂和展开剂之间连续不断吸附解吸,产生差速迁移得到分离。

  二、固定相

  1.硅胶:含水量越高,活性越低,吸附力越弱。在105~110℃加热30min,使其活化。硅胶G、硅胶H、硅胶GF254、硅胶HF254的含义

  2.氧化铝:碱性、中性和酸性三种。活性与含水量有关

  3.聚酰胺:可与酚羟基、羧基、氨基酸形成氢键,选择性高

  三、操作方法

  1.制备:1份固定相与3份水混和涂布,110℃烘30分钟

  2.点样与展开:点样一般为直径2~4mm圆点,距底2.0cm;展开距离一般为10~15cm。

  3.检视:荧光板在紫外光下检视;普通薄层板用物理方法或显色剂显色。

  4.系统适用性试验

  比移值:Rf=l/l0,为组分迁移距离与展开剂迁移距离之比

  比移值的最佳范围是0.3~0.5,可用范围是0.2~0.8。

  影响比移值因素:①被分离物质的结构和性质。极性较强的组分Rf较小。②薄层板性质。吸附剂活性越强,Rf较小。③展开剂性质。极性越强展开剂Rf值增大④展开剂蒸气饱和程度。

  3.分离度:R=2d/(W1+W2),两相邻斑点中心距离与两斑点平均宽度的比值。

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