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　　(四)根据物质分子大小差别进行分离

　　超滤法 —— 利用不同分子量化合物扩散速度不同而分离

　　超速离心法 —— 离心作用

　　1.凝胶过滤法(凝胶过滤色谱、分子筛过滤、排阻色谱)

　　(1)分离原理：分子筛作用，根据凝胶的孔径和被分离化合物分子的大小而达到分离的目的。

　　当混合物溶液通过凝胶柱时，比凝胶孔隙小的分子可以自由进入凝胶内部，而比凝胶孔隙大的分子不能进入凝胶内部，只能通过凝胶颗粒间隙。

　　(2)凝胶的种类与性质

　　葡聚糖凝胶(Sephadex)：只适于在水中应用，且不同规格适合分离不同分子量的物质。

　　羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)：除具有分子筛特性外，在由极性与非极性溶剂组成的混合溶剂中常常起到反相色谱效果。

　　2.膜分离法

　　利用一种用天然或人工合成的膜，以外界能量或化学位差为推动力，对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。

　　膜过滤技术主要包括：渗透、反渗透、超滤、电渗析和液膜技术等。

　　透析法：根据溶液中分子的大小和形态，在微米(μm)数量级下选择性过滤的技术。

　　常压下，小分子可通过，大分子不能通过。

　　按照孔径大小，可将透析膜分为：

　　微滤膜(0.025～14μm);超滤膜(0.001～0.02μm);反渗透膜(0.0001～0.001μm);纳米膜(约2nm)

　　应用：精制药用酶时，用透析法脱无机盐。

　　(五)根据物质解离程度不同进行分离

　　1.离子交换法原理

　　基于混合物中各成分解离度差异进行分离。

　　2.离子交换树脂的结构与性质

　　性质：球形颗粒，不溶于水，但可在水中膨胀。

　　结构：

　　(1)母核部分：由苯乙烯通过二乙烯苯(DVB)交联而成的大分子网状结构。

　　网孔大小用交联度(即加入交联剂的百分比)表示，交联度越大，则网孔越小，质地越紧密，在水中越不易膨胀;交联度越小，则网孔越大，质地疏松，在水中易于膨胀。

　　(2)离子交换基团

　　3.离子交换法的应用

　　(1)用于不同电荷离子的分离：天然药物水提取物中的酸性、碱性及两性化合物的分离。

　　例子交换树脂法分离物质的模型

　　(2)用于相同电荷离子的分离：依据酸性或碱性的强弱不同分离

　　例：

　　碱性强弱：Ⅲ>Ⅱ>Ⅰ——弱酸性树脂吸附强弱：Ⅲ>Ⅱ>Ⅰ

　　(六)根据物质的沸点进行分离

　　分馏法：利用中药中各成分沸点的差别进行分离的方法。

　　一般来说，液体混合物各成分沸点相差在100℃以上时，可用反复蒸馏法达到分离的目的;如沸点相差在25℃以下，则需要采用分馏柱;沸点相差越小，则需要的分馏装置越精细。如挥发油和一些液体生物碱的提取分离常采用分馏法。